試劑準備:

流式染色緩沖液 (Flow Cytometry Staining Buff→ε©↑er) :産品編号TNB-4222-L500

12x75 mm 圓底流式管或 96孔圓底微(wēi)孔闆

染色流程:

1. 制(zhì)備單細胞懸浮液，用(yòng)流式染色緩沖液調整濃度至2 x £₹10 7- 2  x 10 8 cells/mL。

2. 每管（或孔）加50 µL 細胞懸浮液。

3. 加推薦量的(de)抗體(tǐ)到(<σdào)樣品裡(lǐ)，細胞懸浮液+抗體(tǐ)的(de)最終體(tǐ'•σ)積不(bù)應超過100µL。

4. 4°C避光(guāng)孵育20-60分(fēn)鐘(zhōng)。

5. 用(yòng)200-300 µL (微(§±σ✘wēi)孔闆) 或 12 mL (管) 染色緩沖液洗細胞.

6. 300-400 x g室溫離(lí)心5分(fēn)鐘(zhōng)，棄掉上(sh‍π✘àng)清液。短(duǎn)暫渦旋重懸細胞。

7. 如(rú)果不(bù)需要(yào)加二抗，直接調到(dào)第10步 。

8. 如(rú)果二抗是(shì)純化(huà)抗體(tǐ)或生(shēng÷××)物(wù)素偶聯抗體(tǐ)，加100 µL 稀釋好(β£hǎo)的(de)抗體(tǐ)到(dào)✔σ管裡(lǐ)。

9. 4°C避光(guāng)孵育20-60分(±♣®fēn)鐘(zhōng)。

10. 300-400 x g室溫離(lí)心5f分€§✔‌(fēn)鐘(zhōng)，棄掉上(shàng)清液。短(duǎn)暫渦旋重懸細胞。

11. 每管加入适當的(de)染色緩沖液重懸細胞，上(shàng)機(₹ jī)檢測或進行(xíng)胞內(nèi)染色。