1、材料

指示細胞系（見(jiàn)速查表針對(duì)給定的(de)細胞因πε子(zǐ)）

培養基：RPMI1640+10%FBS。

96孔闆（平底）（Costar Cat.No.€λ3595）

細胞因子(zǐ)ELISA配對(duì)或ready-set-goβ© kit

2、儀器(qì)

吸管和(hé)移液器(qì)

恒濕培養箱

96孔微(wēi)孔檢測分(fēn)光(guāng)光(guān™♦ ×g)度計(jì)

3、持續時(shí)間(jiān)

孵育時(shí)間(jiān)24-48小(xiǎo)時(shí)

測定樣品準備時(shí)間(jiān)1小(xiǎo)時(shí)↑‌

4、實驗步驟

（1）向96孔闆每孔中加50ul培養基1640.

（2）使用(yòng)兩倍的(de)連續稀釋液從(cóng)第3排← ↑α到(dào)第12排依次稀釋功能(néng)級别的(de)抗細胞因子(zǐ σ"€)抗體(tǐ)（見(jiàn)速查表标準範圍），留1,2排不(bù)加。

（3）2排到(dào)12排每孔加50ul重組細胞因子(zǐ)和(hé)樣品（濃度見(j™∑σiàn)速查表，第二排是(shì)細胞因子(zǐ)$€'和(hé)指示細胞組，1排是(shì)隻有(yǒu)細胞的(de)對(d©εuì)照(zhào)組）。

（4）1640培養基洗指示細胞三次，重懸調整細胞濃度到(dào)2-3.5×105/¶♠ml（見(jiàn)速查表）。

（5）每孔加100ul細胞懸液。

（6）37度 5%CO2 恒濕培養箱培養24-48小(x<∞εiǎo)時(shí)。

（7）收獲上(shàng)清ELISA檢測細胞因子(zǐ)。

（8）繪制(zhì)标準曲線分(fēn)析數(shù)據。

細胞因子(zǐ)檢測速查指南(nán)表（human and mouse）：