1、WGA-Cre

wheat-germ agglutinin<♠ 小(xiǎo)麥凝集素蛋白(bái)，在神經÷σ↓元中表達後有(yǒu)跨突觸的(de)能​♥(néng)力。偶聯Cre蛋白(bái)的(de)WGA，會(huì)攜帶Cre同時(shí)跨β©‍突觸從(cóng)而标記上(shàng)下(xià)遊神經元。

優點：可(kě)實現(xiàn)細胞特異上(shàng)下(xià)遊标記。

缺點：在一(yī)些(xiē)環路(lù)±​δ中效果不(bù)佳，上(shàng)下(xià)遊均有(y∏§©≈ǒu)可(kě)能(néng)标記。

實驗方案：

在上(shàng)遊注射WGA-Cre病σ↔毒（滴度3E+12VG/mL，體(tǐ)積200nl左右），下(xià)遊注射DIO-GOIδ®≥病毒（一(yī)般用(yòng)血清型9型，滴度3E+12VG/mL，體(tǐ)積200nl左₩§右）

2、AAV1

1型腺相(xiàng)關病毒有(yǒu)一(yī)定的(de∏≤↔↓)向下(xià)遊标記的(de)能(néng)力，雖然這(zhè)種能(néng←ε•)力較弱，但(dàn)足以表達一(yī)定量的(de)Cre等重組酶，誘導下(xià)✔↔∞遊基因的(de)表達。

優點：效率較高(gāo)，目前用(yòng)過的(de)實驗室基本都(♠✔←>dōu)認可(kě)它的(de)順向标記能(néngλε≤≠)力。

缺點：表達較弱，隻能(néng)用(yòng)于表達重組酶，由于要(yào)求病毒滴度較高♦ε (gāo)，注射區(qū)域有(yǒu)一(yī)定毒性。目前使用♦♦✔(yòng)的(de)規模還(hái)較小(xiǎo)，不( ✘αbù)清楚是(shì)否所有(yǒu)環路(lù)都(dōu)适用(yòng)。

實驗方案：在上(shàng)遊注射AAV1（滴度✔£0.7~1.5E+13VG/mL，體(tǐ)積200nl左右），下(xi₩₹ εà)遊注射DIO-GOI病毒（一(yī)般用(yòng)血清型9型，滴度3E+λ✔✔12VG/mL，體(tǐ)積200nl左右）

3、scAAV1 (泰兒(ér)圖獨有(yǒu)，★∑合作(zuò)文(wén)章(zhāng)在發表中)

scAAV是(shì)self-complementary AAV的(de)縮寫，它是( >≥shì)一(yī)種自(zì)互補的(de)AAV，由于它的(de)基因∏×₹¶組本身(shēn)就(jiù)是(shì)雙鏈的(de)，所以它的(d→∞↓™e)表達時(shí)間(jiān)更快(kuài)，效率更高(gāo)。

優點：能(néng)夠在下(xià)遊直接表達熒光(guāng)基團等功能(néng)基因。

缺點：載體(tǐ)容量小(xiǎo)，滴度低(dī)∑÷λ（一(yī)般大(dà)于5E+12VG/mL）™♦。

實驗方案1：在上(shàng)遊注射scAAV1（滴度♦§♣¥3E+12VG/mL，體(tǐ)積200nl左右），下(xià)遊注射DI$&€O-GOI病毒（一(yī)般用(yòng)血清型9型，滴度3E+12Vε₹≈✔G/mL，體(tǐ)積200nl左右）。

實驗方案2：在上(shàng)遊注射scAAV1（滴度≈>3E+12VG/mL，體(tǐ)積200nl左右），下(xià€ ​ )遊直接觀察或者注射Cre，誘導scAAV1攜帶的(de)DIO€₽✔₹-GOI表達。

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