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Premix型反轉錄試劑PrimeScript™ RT Master↓‍ Mix (Perfect Real Time)

貨号：RR036A發布時(shí)間(jiān)：2023-08-16 15:48分(fēn)享： ←♦→

■ 制(zhì)品內(nèi)容 (Code No.: RR036A: 10 μl反應×200次量₽₽γ₩)

5X PrimeScript RT Master Mix (for Real Time)^*1	400 μl
RNase Free dH2O	1 ml ×2 支
EASY Dilution (for Real Time PCR)>>♥‌^*2	1 ml

1 含有(yǒu)PrimeScript RTase♣ασ↔、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dTα∞ Primer、dNTP Mixture、反應Buffer λ∑Ωφ(含有(yǒu)Mg²⁺) 。 2 制(zhì)作(zuò)标準曲線時(shí)梯度稀釋cD<σ<NA或RNA标準品的(de)稀釋液。模闆DNA或RN'←A如(rú)果用(yòng)水(shuǐ)或TE Buffer稀釋時(shí)，由于受Micro> tube吸附作(zuò)用(yòng)等的(de)影(yǐng)響，往往不(bù≥×<)能(néng)準确地(dì)進行(xíng)稀釋，導緻實驗結果精度降低(‌<∑±dī)。使用(yòng)本制(zhì)品時(shí)，即使稀釋至£✔§低(dī)濃度也(yě)能(néng)夠進行(xín✔$εδg)準确地(dì)稀釋，容易在寬廣範圍內(nèi)獲♠≤得(de)準确定量的(de)标準曲線。本制(zhì)品不(bù)影(yǐng)響<™§反轉錄和(hé)PCR反應，用(yòng)其稀釋後的(de)樣品可(k≤™ě)直接使用(yòng)。EASY Dilut₹¶ion (for Real Time PCR) 也(yě)可(kě)以©∞單獨購(gòu)買 (Code No.: 9160/9160Q)。←→ε 注意：EASY Dilution請(qǐng)與本公γα¶司Real Time PCR試劑組合使用(yòng)，對(duì)于其他(tā)公司的(de☆ ≠)同類制(zhì)品的(de)适用(yòng)性本公司尚未進行(xín★ g)确認。

■ 制(zhì)品說(shuō)明(míng)

本制(zhì)品是(shì)2 Step Real Time RT-PCR用(yòng)的(d" e)理(lǐ)想反轉錄反應試劑。5×PrimeScript RT Master Mixσα₹¶中含有(yǒu)定量RT-PCR的(de)反轉錄反應所需的(de)所有(yǒu)δ↔試劑 (PrimeScript RTase、RNase In★₩∑₩hibitor、Random 6 mers、Oligo dT P‍© rimer、dNTP Mixture、反應Buffer)，加入模闆RNA和(hé)水(sh✘↑←♠uǐ)即可(kě)迅速進行(xíng)反應。使用(yòng)具有(yǒu)較強延伸能(né>≠¥ng)力的(de)PrimeScript RTase，與制(zhì)品P±↓★rimeScript RT reagenβγβ≈t Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A↑♦/B) 相(xiàng)同，可(kě)以在較短(duǎn)時(shí)間(jiān)內(≤♦∑♦nèi)高(gāo)效合成Real Time PCR用(yòng)模闆cDNA。本制(zhì)☆♥品合成的(de)cDNA可(kě)以用(yòng)于嵌合法和(hé)探針法qPCR分(fēn)析ε ，可(kě)以根據實驗目的(de)與TB Green^® Premix Ex Taq^™ II (Tli RNaseH Plus) (C♣☆≠ode No. RR820Q/A/B)^* 、TB Green Fast qPCR Mix (Code ≈£<No. RR430S/A/B)^* 和(hé)Probe qPCR Mix (Code No. RR§™391S/A/B) 等定量試劑配合使用(y¥←≈≤òng)，能(néng)夠進行(xíng)高(gāo)性能(néng)的(de)♠&≤✘基因表達分(fēn)析。

*：Takara嵌合法Real Time PCR（qPCR）産品的(de)名稱從(có¶$→ng)2017年(nián)12月(yuè)下(xià)旬開(kāi)始，将逐步變更為(wè<∑♦±i)「TB Green系列」。産品Code、性能(néng)和(hé)原有(∑♠ yǒu)産品相(xiàng)比沒有(yǒu©α)變化(huà)，請(qǐng)繼續放(fàng)心使用(yòn ↓β✔g)。
産品名稱将随新lot的(de)産品逐步變更，産品網頁或≠∞>操作(zuò)說(shuō)明(míng)書(shū)可(kě)能(∏₩∞néng)會(huì)先于産品标簽變更，望知(zhī)悉！

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-20℃。

■ 試劑盒特長(cháng)

1. 制(zhì)品為(wèi)預先混好(hǎ♠☆♦o)的(de)Premix形式，隻需加入模闆RNA和(hé)水(shuǐ)便可(kě)以開(kāγδ✘Ωi)始反應。
2. 可(kě)以在較短(duǎn)時(shí)間©₹≤∏(jiān)內(nèi)高(gāo)效合成Real Time PCR用(yòng)c≥≤©DNA，是(shì)進行(xíng)2 Step Real Tim™ ♥e RT-PCR反應的(de)理(lǐ)想試劑。
3. 使用(yòng)了(le)Random 6 mers和(hé)Oligo¶Ω€ dT Primer 2種反轉錄引物(wù)，可(kě)以$β合成适合Real Time PCR用(yòng)cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要(yào)建立标準曲線，建立标準曲線的(de)條≈δ←件(jiàn)就(jiù)是(shì)需要(yào)将總RNA和(hé)反轉錄c‌→≠DNA稀釋到(dào)較低(dī)的(d®e)濃度。如(rú)果用(yòng)水(shuǐ)或TE Buffer稀釋時(shí)，∏₩≈≥由于模闆濃度低(dī)不(bù)穩定，因而會(huì)縮小(xiǎo)曲線範圍，結果準确度♥ ©≤降低(dī)。本制(zhì)品中附加了(le)标準曲線制(zhì)作(zuò)用(Ω₩★yòng)稀釋液EASY DilutionΩσ☆< (for Real Time PCR)，将Total RNA或cDNA稀釋至低(dγδφī)濃度時(shí)也(yě)能(néng)夠進行(xíng)準确稀釋，容≤↑ 易在寬廣範圍內(nèi)獲得(de)準确定量的(de)标準曲線。

■ 注意事(shì)項

1. 5X PrimeScript RT Master Mix在使用πσ ✔(yòng)前要(yào)小(xiǎo)心地(d‌↔'ì)離(lí)心收集到(dào)反應管底部。由于5X PrimeScript RT Master × Mix粘度高(gāo)，用(yòng)移液槍慢(màn)慢(màn)反複吸 ±✘打充分(fēn)混勻後使用(yòng)。
2. 分(fēn)裝試劑時(shí)務必使用(yòng)新的(de)槍頭 (Tip)，以防δε<•止樣品間(jiān)污染。
3. 本制(zhì)品中已經加入了(le)反轉錄Primer（Oligo dT π≈Primer 和(hé)Random 6 mers），如(rú® ←)果要(yào)使用(yòng)Gene Specific Primer進行(xíng)反轉錄反應₩γ'₩，則不(bù)能(néng)使用(yòng)本制(zhì)品。

Technote：

An efficient method★∑₩ for quantification of human gene expression
levels using PrimeScr↑★ipt reverse transcriptase

Monitoringφ♣" siRNA knockdown: Quantifying transienπ•t knockdown of
LEDGF/p75≠β↑ in docetaxel-resistant pros≈©δ≈tate cancer PC-3-DR cells

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