産品簡介

    m6A修飾是(shì)哺乳動物(wù)中最豐富的(de)RNA表觀修飾，同時(shí)也(yě)是(shì)第一(yī)個(gè)研究相(xiσδàng)對(duì)清楚的(de)RNA表觀修飾，其将表觀遺傳學的(de)研究從(cóng)基因組層面(DNA和(hé)組蛋白(bái)的(de)修飾)推向到(dào)RNA層面，是(shì)生(shēng)物(wù)學中的(de)一(yī)個(‍¥¶gè)重要(yào)研究前沿和(hé)研究熱(rè)點。

     m6A MeRIP分(fēn)析試劑盒使用(yòng)RNA甲基化(huà)免疫沉澱的(de)方法來(lái)識别廣闊轉錄組中的(de)m6A。在RNA甲基化(huà)免疫沉澱分(fēn)析中，采用(yòng)化(huà)學的(de)方法使RNA片段∏€σ 化(huà)到(dào)100左右的(de)核苷酸或更小(xiǎo)的(de)片段采用(yòng)單克隆抗體(tǐ)使←¥∞↔得(de)有(yǒu)吸附力的(de)磁珠用(yòng)免疫沉澱反應将其指$¥↓±向m6A。在免疫沉澱反應之後，分(fēn)離(lí)的φ♣(de) RNA片段采用(yòng)qRT-PCR或RNA- δ測序(RNA-seq)來(lái)進行(xíng)檢測。

産品特點

    此品非常适合從(cóng)各種細胞、組織、哺乳動物(wù)、真菌↔≈™、細菌、植物(wù)、血漿和(hé)血清等樣本中提取的(de)總RNA和(hé)polyA富集的(de)RNA，進行(xíng)特定基因RNA甲基化(huà)水(shuǐ)平的(de)定量分(fēn)析。主要(yào)檢測儀器(qì)：實時(s ♦£hí)熒光(guāng)定量PCR儀或測序儀。

注意事(shì)項

1.所有(yǒu)的(de)耗材須用(yòng)無RNA酶的(de)耗材。本試劑盒的(de)試劑均進行(xíng)過去(qù)RNA酶處理(lǐ)。

2.所有(yǒu)操作(zuò)盡量在冰上(shàng)進行(xíng)，以減少(shǎo)RN♣≤★A的(de)降解。

3.MeRIP對(duì)RNA損失較大(dà)，最後洗脫的(de)RNA盡量用(yòng)低(dī)濃度RNA提取試劑提取。

4.本試劑盒片段化(huà)時(shí)間(jiān)為(wèi)3min，片段化(huà)的(de)RNA大(dà)小(xiǎo)約為(wèi)200-300nt (滿足大(dà)部分(fēn)實驗要(yào)求) 。需要(yào)更小(xiǎσ↓ ↔o)片段的(de)RNA，可(kě)以将時(shí)間(jiān)延長(cháng)，最長(cháng)不(bù)超過5min。

5.本試劑盒經優化(huà)可(kě)以進行(xín¥₹₩g)低(dī)至1ug總RNA 進行(xíng)MeRIP，但(dàn)是(shì)如(rú)果目标RNA豐度較低(dī)，建議(yì)提高(gāo)總γ∏ 的(de)RNA用(yòng)量。

參考文(wén)獻

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